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精制魚油膽固醇測定在國標GB 5009.128-2016的應用與優化「那艾」

發表時間:2024/10/28 10:23:05 閱讀次數:

魚油是油性魚類組織中提取的油脂,內含多種不飽和脂肪酸,具有預防冠心病、抑制血小板凝聚、舒張血管、調節血脂的作用,對心血管亞健康人群有益處l14]。但魚油中膽固醇含量較高,海洋魚油中的膽固醇含量更甚,而高膽固醇食物大量攝入易導致血液膽固醇含量升高,誘發一系列心血管疾病57]。因此,對魚油類產品進行膽固醇指標監控有重要的意義。

根據GB 5009.128-2016《食品安全國家標準食品中膽固醇的測定》8所述,膽固醇的測定有3個方法,分別是氣相色譜法、高效液相色譜法與比色法。魚油屬于動物性食品,因此3種方法均適用。考慮到比色法的測定原理為固醇類化合物與酸作用產生i顏色物質,當樣品音膽國E大以外的固醇類物質時,同樣會發生顯色反應,方法特異性較差,導致測定結果偏大l3。利用色諧效(傳是性強、液相色譜)進行分析的方法,具有分隔雙E問、符研名個業準確度高、人為誤差帶入少等優點,因而被較多企業與第三方檢測機構選用,為目前主流的分析方法。但完全按照GB 5009.128-2016所述進行測定,皂化加熱后冷卻放置的時間不同導致樣品回收率、含量相對標準偏差(rclativestandard deviation,RSD)大等問題;批量處理樣品若采用電熱套進行皂化加熱手段,需借助排插開聯多個電潤書同時加熱以縮短實驗時間,存在安全用電隱患,不適當的測定方法出現專屬性不符合規定等問題。本文針對在分析測定精制魚油膽固醇過程中遇到的問題及探索出的解決方案進行總結,為日后精制魚油中膽固醇的分析工作提供經驗參考。

那艾-全自動冷凝回流提取儀

皂化:精密稱取魚油樣品0.25 g,于250 mL平底燒瓶中,加入30 mL無水乙醇,10 mL 60%(質量分數)氫氧化鉀溶液,混勻。將試樣于100 °℃水浴皂化回流1 h,不時振蕩以防止試樣黏附在瓶壁上,皂化結束后,用5 mL無水乙醇自冷凝管頂端沖洗其內部,取下燒瓶,室溫放置冷卻。

提取:定量轉移全部皂化液于250 mL分液漏斗中,用30 mL水,分3次沖洗圓底燒瓶,洗液并入分液漏斗,再用40 mL石油醚-乙醚混合液(1:1,體積比),分3次沖洗圓底燒瓶并入分液漏斗。振搖2 min,靜置,分層。轉移水相,合并3次有機相,每次用100 mL水洗滌提取液至中性,初次水洗時輕輕旋搖。為防止乳化,提取液經約10 g無水硫酸鈉脫水后轉移到250 mL圓底燒瓶中。

濃縮:將上述圓底燒瓶中的提取液于40℃旋蒸至干,殘渣用無水乙醇溶解并定容至5 mL,得到樣品溶液。

本研究以GB5009.128-2016《食品安全國家標準食品中膽固醇含量測定》為參考依據,分別對測定方法、皂化加熱方式、皂化冷卻后放置時間進行優化與考察,優化過的條件經過了定量限、線性、精密度、加標回收率、穩定性與系統耐用性的考察,證實該方法適用于精制魚油膽固醇的含量測定。


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